基于網(wǎng)絡藥理學和實驗驗證分析雞血藤治療卵巢癌的分子機制

刊物

中國中藥雜志

刊號

1001-5302,CN 11-2272/R

摘要

通過網(wǎng)絡藥理學和分子對接及體外細胞實驗，對雞血藤 Spatholobi Caulis 治療卵巢癌（ovarian cancer，OC）的 主要活性成分及其潛在的作用機制進行探討。運用中藥藥理學數(shù)據(jù)庫與分析平臺（TCMSP）獲取雞血藤的主要活性成 分及其預測靶點，通過 GeneCards、OMIM、PharmGkb、TTD、DrugBank 數(shù)據(jù)庫檢索獲得疾病基因。將疾病及藥物預 測靶點進行交集處理，篩選出共同的潛在治療靶點。運用 Cytoscape 3.7.1 軟件構建“藥物-成分-疾病-靶點”相互作用網(wǎng) 絡圖；運用 STRING 數(shù)據(jù)庫構建蛋白相互作的 PPI 網(wǎng)絡。運用 Rversion 4.0.5 進行 GO 與 KEGG 功能富集分析。分析 對接虛擬篩選的處理和優(yōu)化由 Schr?dinger Maestro 軟件完成。該研究篩選出雞血藤 23 個活性成分，涉及 75 個卵巢癌 靶點及 178 個相關信號通路；網(wǎng)絡分析結果表明雞血藤可能通過作用于 GSK3β、Bcl-2、Bax 等關鍵靶點，發(fā)揮抗卵 巢癌作用；分子對接結果顯示 GSK3β 與活性成分櫻黃素結合活性較好。最后體外實驗將篩選出的雞血藤活性成分櫻 黃素對人卵巢癌細胞 SKOV3 進行核心靶點和通路的初步驗證。采用 CCK-8 法檢測細胞增殖情況，使用流式細胞儀檢 測櫻黃素對人卵巢癌細胞 SKOV3 凋亡的影響。運用 Western blot 法檢測櫻黃素靶點及相關調(diào)控蛋白的表達。體外細 胞實驗證明，櫻黃素對卵巢癌細胞的增殖有明顯的抑制作用，并且櫻黃素對 SKOV3 有誘導凋亡的作用。Western blot  實驗結果表明，櫻黃素可以通過抑制 GSK3β 磷酸化的發(fā)生，調(diào)控下游 Bcl-2、Bax 蛋白的表達，誘導 SKOV3 細胞凋 亡的發(fā)生。該研究揭示了網(wǎng)絡藥理學預測并指導實驗設計的科學性，證實櫻黃素可通過阻斷 GSK3β/Bcl-2/Bax 細胞信 號轉(zhuǎn)導通路治療卵巢癌，為雞血藤治療卵巢癌的機制研究提供依據(jù)。